賽默飛NanoDrop One光度計(jì)測量mRNA的過程相對(duì)簡單且高效,以下是詳細(xì)的測量步驟:
一、準(zhǔn)備階段
1.確保儀器處于良好狀態(tài):
在使用NanoDrop One光度計(jì)之前,應(yīng)確保儀器已經(jīng)過適當(dāng)?shù)男?zhǔn),并且處于良好的工作狀態(tài)。
檢查儀器的光源、檢測器和觸摸屏界面是否正常。
2.準(zhǔn)備樣品:
從實(shí)驗(yàn)中提取出mRNA樣品,并確保其質(zhì)量和數(shù)量滿足測量要求。
使用適當(dāng)?shù)木彌_液或溶劑對(duì)樣品進(jìn)行稀釋(如果需要),以確保樣品濃度在儀器的測量范圍內(nèi)。
3.設(shè)置測量參數(shù):
打開NanoDrop One光度計(jì),并通過觸摸屏界面選擇mRNA測量模式。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)置測量波長和測量參數(shù),如吸光度范圍、濃度范圍等。
二、測量階段
1.放置樣品:
使用移液器將1~2μL的mRNA樣品準(zhǔn)確地滴加到NanoDrop One光度計(jì)的檢測平臺(tái)上。
確保樣品均勻覆蓋檢測平臺(tái)的光路區(qū)域,并避免產(chǎn)生氣泡。
2.啟動(dòng)測量:
在觸摸屏界面上點(diǎn)擊“開始測量”按鈕,NanoDrop One光度計(jì)將自動(dòng)進(jìn)行mRNA濃度的測量。
測量過程中,儀器會(huì)發(fā)射出特定波長的光并檢測樣品對(duì)該光的吸收程度。
3.讀取結(jié)果:
測量完成后,NanoDrop One光度計(jì)將在觸摸屏界面上顯示mRNA的濃度和純度信息。
可以通過內(nèi)置的Wi-Fi功能將測量數(shù)據(jù)傳輸至實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)(LIMS)或?qū)С鲋疗渌O(shè)備進(jìn)行分析。
三、注意事項(xiàng)
1.樣品純度:
在測量mRNA之前,應(yīng)確保樣品的純度足夠高,以避免雜質(zhì)對(duì)測量結(jié)果的影響。
可以使用NanoDrop One光度計(jì)內(nèi)置的Acclaro?樣品智能技術(shù)來檢測樣品中的潛在污染物,并根據(jù)儀器建議調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案。
2.樣品體積:
NanoDrop One光度計(jì)對(duì)樣品體積的要求較低,通常僅需1~2μL即可。
在滴加樣品時(shí),應(yīng)確保樣品量準(zhǔn)確且均勻覆蓋檢測平臺(tái)的光路區(qū)域。
3.儀器校準(zhǔn):
定期對(duì)NanoDrop One光度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)是確保測量結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。
應(yīng)按照儀器說明書中的指導(dǎo)進(jìn)行校準(zhǔn)操作,并在每次使用前檢查校準(zhǔn)狀態(tài)。
4.數(shù)據(jù)記錄與分析:
在測量過程中,應(yīng)詳細(xì)記錄每個(gè)樣品的測量數(shù)據(jù)和相關(guān)信息。
可以使用專業(yè)的數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)測量數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步的處理和分析,以獲取更多有用的信息。
綜上所述,賽默飛NanoDrop One光度計(jì)測量mRNA的過程包括準(zhǔn)備階段、測量階段和注意事項(xiàng)三個(gè)方面。通過遵循這些步驟和注意事項(xiàng),可以確保測量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。