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NanoDrop One光度計(jì)的使用流程是什么
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科匯華晟

時(shí)間 : 2025-03-23 11:56 瀏覽量 : 18

NanoDrop One光度計(jì)的使用流程主要包括以下幾個(gè)步驟:


1. 開機(jī)與初始化

開機(jī):接通電源,打開NanoDrop One光度計(jì)的電源開關(guān),等待儀器完成初始化。

檢查界面:初始化完成后,屏幕上會出現(xiàn)主界面,顯示常用的測量選項(xiàng)分類,如核酸(Nucleic Acid)、蛋白質(zhì)(Protein)等。


2. 選擇檢測方法

核酸測量:如果測量的是DNA或RNA,選擇“Nucleic Acid”選項(xiàng),然后進(jìn)一步選擇具體的核酸類型,如dsDNA(雙鏈DNA)、ssDNA(單鏈DNA)或RNA。

蛋白質(zhì)測量:如果測量的是蛋白質(zhì),選擇“Protein”選項(xiàng),然后選擇蛋白質(zhì)定量方法,如Protein A280(基于280nm吸光度的蛋白質(zhì)定量)。


3. 基座清潔與調(diào)零

基座清潔:使用移液器吸取2μL蒸餾水(或去離子水)加到檢測基座上,將樣品臂放下,浸泡2-3分鐘,然后用無塵紙或擦鏡紙將檢測基座擦拭干凈。

調(diào)零:在清潔后的基座上,再次使用移液器加2μL蒸餾水(或選擇與樣品對應(yīng)的緩沖液,如Elution Buffer),放下探頭。如果“Blank”(空白檢測)按鈕右側(cè)顯示為“ON”,則儀器將自動進(jìn)行調(diào)零;如果顯示為“OFF”,需要手動點(diǎn)擊“Blank”按鈕進(jìn)行調(diào)零。


4. 樣品測量

加樣:將加樣表面和上探頭的蒸餾水用濾紙吸去,然后使用移液器吸取2μL樣品加到檢測基座上。

測量:放下上探頭,如果“Measure”(測量)按鈕右側(cè)顯示為“ON”,則儀器將自動進(jìn)行測量;如果顯示為“OFF”,需要手動點(diǎn)擊“Measure”按鈕進(jìn)行測量。


5. 查看結(jié)果

顯示結(jié)果:測量結(jié)束后,屏幕左側(cè)會顯示掃描峰圖,右上角列表會顯示檢測值,包括濃度、A260/A280(對于核酸)或A280吸光度(對于蛋白質(zhì))等參數(shù)。

詳細(xì)數(shù)據(jù):向左滑動屏幕可以查看詳細(xì)數(shù)據(jù),包括濃度、A260/A280、A260/A230(對于核酸)以及260nm、280nm等波長的檢測值。


6. 連續(xù)測量與更換樣品

連續(xù)測量:如果需要測量多個(gè)樣品,可以在測量完一個(gè)樣品后,將加樣表面和上探頭的樣品用濾紙吸去,然后加上下一個(gè)樣品,重復(fù)測量步驟。

更換空白對照:如果更換了不同的空白對照溶液(如緩沖液),需要吸去樣品,清潔基座,加上新的空白對照溶液,重復(fù)調(diào)零和測量步驟。


7. 數(shù)據(jù)導(dǎo)出與結(jié)束實(shí)驗(yàn)

數(shù)據(jù)導(dǎo)出:實(shí)驗(yàn)完成后,如果需要導(dǎo)出數(shù)據(jù),可以插入U(xiǎn)SB驅(qū)動器,點(diǎn)擊屏幕上的導(dǎo)出按鈕,選擇需要導(dǎo)出的數(shù)據(jù)信息(如測量數(shù)據(jù)、光譜數(shù)據(jù)、查看器文件等),點(diǎn)擊確認(rèn)后數(shù)據(jù)傳輸完成。

結(jié)束實(shí)驗(yàn):點(diǎn)擊屏幕右下角的結(jié)束實(shí)驗(yàn)按鈕,完成整個(gè)測量過程。


8. 儀器清潔與維護(hù)

清潔儀器:測量結(jié)束后,使用移液器吸取2μL蒸餾水加到檢測基座上,放下上探頭浸泡30秒,然后用無塵紙或擦鏡紙清潔上下探頭和基座。

維護(hù)儀器:定期檢查儀器的性能,確保儀器處于良好狀態(tài)。避免儀器受到陽光直射、強(qiáng)風(fēng)吹拂或潮濕環(huán)境的影響。


注意事項(xiàng)

樣品準(zhǔn)備:在測量前,確保樣品充分混勻,避免氣泡和雜質(zhì)的影響。

加樣量:加樣量一般為2μL,但對于粘稠的樣品,可適當(dāng)增加加樣量,但需保證樣品不溢出。

避免重復(fù)測量:在測量過程中,避免重復(fù)點(diǎn)擊“Measure”按鈕,如果需要重復(fù)測量,應(yīng)先擦去樣品,重新加樣后再進(jìn)行測量。

樣品類型選擇:在測量蛋白質(zhì)時(shí),確保正確選擇樣品類型,以便儀器能夠準(zhǔn)確計(jì)算濃度。


通過以上步驟,您可以正確使用NanoDrop One光度計(jì)進(jìn)行核酸和蛋白質(zhì)的濃度與純度分析。


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