星形膠質細胞(Astrocytes)和神經元(Neurons)共培養(yǎng)是一種重要的體外細胞培養(yǎng)模型,用于研究神經系統(tǒng)的發(fā)育、功能和疾病等方面。在這種共培養(yǎng)模型中,星形膠質細胞和神經元相互作用,模擬了體內神經系統(tǒng)中膠質細胞和神經元之間的相互聯(lián)系。
1. 細胞系來源
星形膠質細胞和神經元可以分別從小鼠或大鼠的大腦組織中分離得到。
2. 細胞培養(yǎng)基選擇
星形膠質細胞常用的培養(yǎng)基包括DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)或者Neurobasal培養(yǎng)基等,添加10%胎牛血清(FBS)或者神經營養(yǎng)因子(如BDNF、NGF等)。
神經元常用的培養(yǎng)基也是Neurobasal培養(yǎng)基,添加神經營養(yǎng)因子和血清,以促進神經元的生長和成熟。
3. 培養(yǎng)條件的優(yōu)化
培養(yǎng)溫度一般為37攝氏度,CO2濃度為5%,在濕潤、含CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),有利于維持細胞的生長和代謝。
4. 細胞密度的控制
星形膠質細胞和神經元的密度需要適當控制,以確保它們能夠在共培養(yǎng)系統(tǒng)中正常生長和相互作用。
5. 共培養(yǎng)系統(tǒng)的建立
將星形膠質細胞和神經元分別接種到同一培養(yǎng)皿中,以確保它們在共培養(yǎng)系統(tǒng)中相互作用。
通常使用多孔膜轉移裝置(Transwell)等裝置,將星形膠質細胞和神經元分隔在兩側,但允許它們通過孔隙進行相互作用。
6. 實驗操作
定期觀察和記錄細胞的形態(tài)和生長狀態(tài),以及神經元的突觸形成和神經網絡的形成。
在共培養(yǎng)系統(tǒng)中進行功能性實驗,如神經元電生理記錄、藥物處理等,以研究神經元和星形膠質細胞之間的相互作用及其對神經系統(tǒng)功能的影響。
7. 應用與意義
星形膠質細胞和神經元共培養(yǎng)系統(tǒng)模擬了體內神經系統(tǒng)的復雜結構和功能,為研究神經系統(tǒng)的發(fā)育、功能和疾病提供了重要的體外模型。該共培養(yǎng)系統(tǒng)可用于研究神經元-星形膠質細胞相互作用、神經元突觸形成、神經系統(tǒng)中的代謝調節(jié)和信號傳導等方面,為神經科學研究提供了有力的工具和平臺。